การวิเคราะห์ปริมาณของแคทเทชินในน้ำมันเมล็ดชา จากต้นคาเมลเลียโอเลเฟรา เอเบลQuantification of Catechin in Tea Seed Oil from Camellia oleifera Abel.

Abstract

บทคัดย่อ

การใช้เครื่องโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง (HPLC)  เป็นเทคนิคที่ง่าย  เชื่อถือได้  และทำซ้ำได้ ซึ่งในการวิจัยนี้ ได้นำมาพัฒนาเพื่อศึกษาการตรวจสอบความถูกต้องของการหาปริมาณแคทเทชินในสารสกัดน้ำมันเมล็ดชาจากต้นคาเมลเลียโอเลเฟรา เอเบล การทดสอบหาสภาวะที่เหมาะสมโดยใช้คอลัมน์ชนิด ACE (C₁₈ ขนาด 150 × 4.6 มม.)  ด้วยเมทานอลในน้ำที่มีกรดอะซิติก 2 % มีสัดส่วนโดยปริมาตร 11 ต่อ 89 เป็นตัวทำละลายเคลื่อนที่ ใช้อัตราการไหลที่ 1 มิลลิลิตรต่อนาที ในระบบ แบบเดี่ยว (isocratic system ) และวัดความยาวคลื่นที่ 280 nm แล้วพบว่าความถูกต้องของการใช้แคทเทชินเป็นสารมาตรฐานแสดงด้วย ความเป็นเส้นตรงของวิธีการนี้ (R² = 0.999) ความแม่นยําของวิธีการ (RSD <4%) สำหรับความเข้มข้นช่วง 20-100 ppm โดยมีกรดกัลลิกเป็นสารมาตรฐานเทียบภายใน การวิเคราะห์ขีดจํากัดต่ำสุดของการทดสอบเชิงคุณภาพ คือ  1.061 ppm และความเข้มข้นต่ำสุดที่วิธีวิเคราะห์สามารถวิเคราะห์เชิงปริมาณได้คือ 3.54 ppm วิธีการนี้สามารถใช้ตรวจวิเคราะห์หาแคทเทชินที่สกัดจากน้ำมันเมล็ดชาที่ขายทั่วไปด้วยตัวทำละลาย 3 ชนิดอย่างต่อเนื่อง โดยงานวิจัยนี้พบว่า ความเข้มข้นเฉลี่ยของน้ำมันเมล็ดชาตัวอย่างที่ขายตามท้องตลาดที่สกัดแล้วอยู่ที่ 4.27 ± 0.0908 ppm (n=3) ผลงานวิจัยนี้สามารถใช้ในการควบคุมคุณภาพและเป็นประโยชน์อ้างอิงสำหรับการใช้พัฒนาเป็นอาหารเสริมและอุตสาหกรรมการทางยาต่อไป

Abstract

A high performance liquid chromatographic (HPLC) method was developed and validated for quantitative determination of polyphenols (catechin) in extracts of Camellia oleifera Abel. The analysis was carried out on ACE-HPLC Column (C₁₈ with 150 × 4.6 mm) using methanol-water containing 2%acetic acid (11:89 v/v) as mobile phase under isocratic system. The flow rate was 1.0 mL/min and the detection was at 280 nm. The validation using catechin as standard demonstrated that the method presented linearity (linear correlation coefficient = 0.999), precision (relative standard deviation <4%) in the concentration range 20-100 ppm with gallic acid as internal standard. The limit of detection (LOD) was 1.061 ppm and the limit of quantification was 3.54 ppm. This method allowed the identification of catechin in the ethyl acetate extracts obtained from the commercial tea oil. The average concentrations of (+)-Catechin in the commercial tea seed oil was 4.27 ± 0.0908 ppm (n=3). Results obtained in this study will serve as quality control and useful reference for supplement development and pharmaceutical industry.